高速逆流色谱仪的主要原理介绍
点击次数:1839 更新时间:2022-08-16
高速逆流色谱法 (High-speed Countercurrent Chromatography,简称HSCCC),是一种连续高效的液液分配色谱技术,与其它色谱技术不同的是它不需任何固态载体,因此能避免固相载体表面与样品发生反应而导致样品的污染、失活、变性和不可逆吸附等不良影响。同时它也具有适用范围广、快速、进样量大、费用低、回收率高等优点。因此,己在生物、医药、食品、材料、化妆品和环保等领域获得了广泛的应用,尤其是在天然产物活性成分的分离纯化领域受重视。
应用范围广,适应性好。由于溶剂系统的组成与配比可以是无限多的,因而从理论上讲HSCCC适用于任何极性范围的样品的分离,所以在分离天然化合物方面具有其独到之处。并因不需固体载体,而消除了气液色谱中由于使用载体而带来的吸附现象,适用于分离极性物质和其它具有生物活性的物质。
原理
在对旋转管的流体动力平衡进行研究时,偶然发现了高速逆流色谱法,其为建立于单向性流体动力平衡体系之上的一种逆流色谱分离方法。当使用缓慢的速度转动螺旋管时,螺旋管中的两相由一端分布到另一端,将其中一相当作移动相,由一端往另一端洗脱时,在螺旋管里,另一相的保留值约为一半,然而随着移动相流速的增大,这一保留量会减小,从而降低了分离效率。然而加快螺旋管的转速,会改变两相的分布,当转速达到临界范围时,沿螺旋管长度两相就会*分开,其中首端的一段会由某一相全部占据,这一段被叫做首端相,尾端的一段由另一段全部占据,这一段被叫做尾端相。两相的这种单向性分布特征正好为高速逆流色谱所利用。在高的螺旋管转动速下,若由首端相往尾相送入,其将穿过首端相往螺旋管的尾端移动。当分离时,先将其中的一相(固定相)注入到螺旋管内,之后将移动相由合适的一端泵入,使其载着样品在螺旋管中无限次的分配。固定相随着仪器的转速越快,保留的越多,也就会有越好的分离效果,并且使分离速度得到大大地提高,所以叫做高速逆流色谱。
应用领域:
(1)天然产物已知有效成分的分离纯化
(2)化学合成物质的分离纯化
(3)中药指纹图谱和质量控制研究
(4)抗生素的分离纯化
(5)天然产物未知有效成分的分离纯化(新化合物开发)
(6)海洋生物活性成分的分离纯化
(7)放射性同位素分离
(8)多肽和蛋白质等生物大分子分离以及手性分离等。